细胞冻存在细胞培养及细胞生产中是非常重要的一环，将活体细胞以极低温度保存，其主要目的是保留细胞在特定状态下的生物学特性，并确保在未来实验、疾病治疗或其他应用中能够维持其活力和功能。这种技术被广泛应用于医学研究、生物技术和临床医学领域，例如细胞治疗、器官移植、遗传学研究以及疫苗生产中。另外，在免疫细胞储存中，我们选择在相对年轻或免疫力较好时，将状态良好的细胞冻存，以便在将来患病、衰老或免疫力减弱时使用。

何为“最好细胞”？什么时机合适进行冻存？

人非小细胞肺癌细胞

（左图密度较低不适合冻存，右图细胞形态和密度各方面都很好，适合冻存）

说到这里，我们先来讨论一个很有代表性和共性的问题：

细胞治疗产品的制剂形式，该选择新鲜细胞形式还是液氮冻存形式？

对于选择新鲜细胞作为制剂形式，一般认为其优势主要有：

1、活细胞状态好，有利于生物活性功能的发挥；

2、制剂配方简单，而冻存带来更多的操作，反而引入了风险和不确定性；

3、避免引入DMSO等物料，排除一些安全性隐患。

不过，随着行业的研究和技术的进步，以及生物样本库的蓬勃发展，当今的主流观点已逐渐趋于能冻尽冻。主要考虑因素如下：

1、开展药物的研究，一定要以“成型”的药物制剂作为药学研究的终点，细胞治疗产品作为一种特殊的药物，也必须遵循药物研发的一般规律。

药物制剂，是具象化的概念——看得见、摸得着、可评价。“成型”的细胞制剂，常规的特征至少包括，细胞数量及活率、辅料、包装容器、标签、检测报告等要素，这些要素都要符合法律法规的相关要求，对于细胞治疗产品，选用冻存形式，才具备“药物制剂”的基本特征，新鲜细胞制剂很难全部满足上述要求。

例如：检测报告有两个基本原则：一个是实物检测，不能用替代物，另一个是报告实际检测结果，而不能是报告预测的结果。仅从检测所需要的合理时间来说，很多检测项目历时比较久，短则几个小时或一天，长则几天甚至几周时间，新鲜细胞制剂，显然很难同时附带检测报告的。只有冻存状态的细胞制剂，才能支持完成合理的成品检测，也就意味着，冻存状态的细胞制剂，才算作“成型”的细胞制剂。

2、药物制剂研究，需要完成的事项众多。细胞药物做成制剂，远不是说把细胞装到冻存管或转移袋中这么简单。

药物制剂是一门专门的工程学科，从剂型剂量的选择，到处方的确定，再到加工工艺、制剂的检测放行、制剂的稳定性，以及加工后制剂的单位均匀性、药物的安全性和有效性、给药途径、包装与贮藏、标签与说明书等重要且必要的要素都需要逐项研究并解决。细胞制剂采用冻存的形式，才能做一些对比研究，提供制剂研究的必要条件，而新鲜细胞制剂很难支持这些研究。

例如：细胞制剂绝大部分是需要满足注射剂的要求，注射剂的特征中，细胞的总量和密度，辅料的种类配比和浓度，包装形式和密封形式等，都需要一个稳定的制剂形式来开展研究，新鲜状态的细胞制剂形式很难满足这些诉求。

3、冻存的细胞制剂，有利于安排生产。

细胞治疗产品的生产，涉及到的工序较多，物料种类也较多，周期一般也较久，相较于大部分新鲜细胞制剂只能保存几个小时而言，冻存的细胞制剂能存放的时间周期更长，不受细胞制剂临床使用时机所限，对于生产来讲是非常有利的。工艺固定化、产能批量化、排产可预期的生产才是工业化生产的特征，不具备这些特征，则更多还是科研型的阶段，不够成熟。

4、冻存的细胞制剂形式，才能完成必要的成品检测和放行程序。

冻存的细胞制剂，才能完成按照法律法规要求的取样抽样，严格完成各项检测，完全检测合格后的产品放行程序，而新鲜细胞是很难做到的。

5、冻存的细胞制剂形式，更能支持多剂量的生产以及具备大规模推广应用的条件。

很多的细胞治疗产品，临床应用上有多次使用的要求，对于细胞治疗产品的生产，也就提出了规模上的要求。采用冻存的细胞制剂形式，更具备一次生产多剂量的可能。同时，新鲜细胞保存期短、运输限制多，这些天然的缺陷限制了其大规模的推广和应用。

6、冻存的细胞制剂形式，有利于应用端。

新鲜的细胞制剂，把药物生产和临床应用、患者三者紧密地绑定在一起，会造成很多困难，应对意外情况欠缺足够灵活性。当采用冻存的细胞制剂形式时，可有效解决临床应用上的难题。

例如：细胞制剂制备好后，患者可能存在种种可能性不具备接受治疗的条件，导致无法接受治疗；另一方面，患者具备治疗窗口时，细胞制剂能否如期制备好，也存在很多不确定性；对于医疗机构及时安排治疗也造成不小的困难。

7、冻存的细胞制剂形式，更加符合NDA需要的形式。

对于拟走药物途径的细胞，需认识到，国家药物监管部门审评审批的核心是“药物”，也就意味着，只有冻存的细胞制剂，更加符合“药物”的基本特征。新鲜细胞的制剂，更像是一项医疗技术。

诚然，冻存的细胞制剂形式也非全是优点，但规模化生产，本身就是一门妥协的艺术，要基于目前的各种现实情况和技术能力，权衡各种利弊，做出当下最优或较优的选择。科研成果从实验室走出来，实现从样品到产品，再到商品的转变，也是从科学界到产业界的华丽蜕变，产业化的思维还是必不可少的。总的来说，细胞冻存是保障细胞培养的持续稳定进展的重要组成部分。标准化的大规模细胞冻存平台技术的发展，对建立质量优异且均一稳定的生产用细胞库更是重中之重。

对于细胞冻存技术，我们需要研究和关注的维度还有很多，比如细胞损伤机制的研究、冻存保护剂的选择与使用、降温速率与降温方式、冻存介质的选择等等。基于细胞治疗产品制造工艺中的多重考虑，基于此，我们即将开展一期《CGT产品开发与应用细胞冻存技术》专题培训。

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